UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO
FALCULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE
LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO
CATEDRA DE:
TÉCNICAS
HISTOLÓGICAS
DOCENTE:
LIC.
IVÁN PEÑAFIEL
GRUPO: N°9
TERCER SEMESTRE
PERIODO ACADÉMICO: OCTUBRE
2015- FEBRERO 2016
RIOBAMBA – ECUADOR
INTRODUCCIÓN
En la actualidad para el diagnóstico de ciertas patologías usamos las biopsias en vivos
y en casos de los cadáveres las necropsias. En el área del laboratorio de
anatomía patológica llegan piezas
quirúrgicas las cuales debemos realizar una serie de procesos como son la
macroscopia, inclusión de tejidos, microtomía, baño de flotación…
Después de realizar los cortes sucesivos del bloque gracias
al micrótomo los tejidos quedan encogidos de esta forma no se podría colocarlos
directamente en el porta objetos.
El baño de flotación nos ayuda con este problema. Es decir
que la función básica de este aparato es extender el listón de tejido para que
posteriormente se adhiera a la laminilla.
En este aparato se debe coloca una sustancia par que el tejido se estire, como: agua, gelatina sin sabor…
En este aparato se debe coloca una sustancia par que el tejido se estire, como: agua, gelatina sin sabor…
Cabe recalcar que es conveniente tener este aparato cerca del
micrótomo, evitando que en el traslado de los listones de tejidos al equipo estos se rompan y toque realizar
otros cortes, desperdiciando tiempo.
Además debe tomarse en cuenta que este equipo se debe tenerlo en una mesa firme pues
el movimiento del baño de flotación produce que los listones se peguen unos
contra otros, dañándose totalmente estos listones.
La importancia del baño de flotación radica que este nos ayuda a que
los listones de tejido se extiendan, para posteriormente pescarlos y que estos
queden fijos al porta objetos.
OBJETIVOS
OBJETIVO
GENERAL
Conocer sobre el baño de
flotación y la pesca de los listones mediante la adquisición de
conocimientos a través de la investigación para la obtención de listones de tejidos
completamente estirados y fijos al porta
objetos.
OBJETIVOS
ESPECÍFICOS
Ø Reconocer
la importancia del baño de flotación.
Ø Identificar
cual es la sustancia más adecuada para que los listones de tejidos se estiren
en el baño de flotación, mediante la búsqueda
de conocimientos.
Ø Conocer
el equipo de baño de flotación, sus
características y a que temperatura
trabaja el mismo mediante la investigación bibliográfica o en la web para
informarnos sobre ello.
Ø Identificar cuáles son los posibles problemas
que pueden presentarse al momento del uso de baño de flotación mediante la
investigación de los mismos en medios de consulta, para informarnos y de esta
forma evitar futuros errores.
MARCO TEÓRICO
BAÑO DE FLOTACION
Están constituidos por un tanque fabricado
en material inoxidable, el cual tiene montado en la parte inferior del mismo un
conjunto de resistencias eléctricas mediante los cuales transfieren calor a un
medio como agua o aceite, que se mantiene a una temperatura preseleccionando a
través de un dispositivo de control.
Se pone en agua a 47°C aproximadamente, se
pone en un portaobjetos y se añade alcohol, gelatina sin sabor, goma para
extender y deslizar el tejido, ya deslizado este se levanta y se coloca sobre
una laminilla, entonces se pasa a la desparafinacion sobre una platina o estufa
a más de 60°C-70°C para pasar luego a la tinción. (1)
Los
cortes se extienden al depositarlos sobre la superficie del líquido ex tendedor
contenido en un recipiente Esto impide que se formen facetas desiguales en el
filo de la denominado “baño de flotación” (éste mantiene la navaja
produciéndose, con ello, un afilado deficiente. temperatura entre 40o a 45o C).
Las secciones se depositan en el líquido
procurando que la superficie brillante (aquella correspondiente al filo de la
navaja) se ponga en contacto con el líquido caliente. En caso que ciertas
arrugas persistan, se emplean unas
pinzas finas o un pincel de pelo de camello, para ejercer una ligera tracción entre los extremos de los
cortes y así desarrugarlos totalmente.
Las secciones se extienden aisladas o
formando cintas, estas se recogen y adhieren al portaobjetos de la misma forma:
en el caso que se requiere recoger los cortes aislados, extendido previamente
como una cinta, deben separarse utilizando las mismas pinzas finas o agujas de
disección. (2)
Para garantizar una mejor adhesión de los
cortes a los porta objetos se recomienda incorporar sustancias adherentes al líquido
ex tendedor en ciertos casos al portaobjetos.
Estas sustancias suelen emplearse de los
manetas:
a)
Extensión
previa de la sustancia adherente a una de las superficies de la lámina
portaobjetos, por ejemplo, la albúmina de Mayer, constituida por partes iguales
de glicerina y clara de huevo, a la mezcla se le añaden algunos cristales de
timol como ingrediente conservante. La mezcla se filtra y se guarda en
refrigeración. Se le utiliza extendiendo una gota de la mezcla en el
portaobjetos y se deja secar. Los cortes se recogen cuidadosamente sumergiendo,
por debajo de ellos, el portaobjetos en forma oblicua.
Otra sustancia adherente
que se emplea de la misma manera es la poli- L-lysina (solución de 25
miligramos de la sustancia en 25 ml de agua destilada). Una gota de la solución
se extiende en el portaobjetos y éstos se secan a 50 o - 55o C. durante toda la
noche y está lista para su uso
b)
Al
líquido de flotación se le añaden sustancias. Uno de los procedimientos más
sencillos es coloración el que consiste en disolver, en el agua ya caliente del
baño de flotación (dos litros) 0.5 g de gelatina.
En otros casos se emplea una solución que posee los
ingredientes siguientes:
- agua destilada
--------------------------------- 1,000 ml
- bicromato de
potasio--------------------------0.2 gramos
- gelatina
-----------------------------------------0.2 gramos
El agua destilada se calienta a 60 o C
para disolver en la gelatina y el bicromato de potasio, sucesivamente. Se filtra
y está lista para su uso. Este líquido previamente filtrado se puede utilizar
varias veces. (se recomienda guardarlo en el refrigerador). (2)
PARTES DEL BAÑO DE FLOTACION
Regulador
Termometro
Perilla de ajuste
Canastilla
Ø Baño de flotación para cortes de parafina
Ø Parte interior fabricado en aluminio anodizado
de color negro para una óptima visualización de los cortes
Ø Parte exterior recubierto de expoxi
Ø Regulación de temperatura desde ambiente
hasta 90°C
Ø Presión +- 105°C
Ø Capacidad: 1.7 litros (3)
TIPOS
DE BAÑOS DE FLOTACIÓN
ü Regulacion de temperatura desde ambiente
hasta 70°C
ü Reborde superior calefactado para secado
de preparaciones
ü Dimensione exteriores: 500x450x80mm
ü Peso: 4kg
BAÑO DE FLOTACION PARA
CORTES DE TEJIDO
v Baño de flotación para cortes de parafina
v Parte interior fabricado en aluminio
anodizado de color negro
v Control para microprocesador
v
Display para lectura
digital de la temperatura
v Memoria de temperatura
v Regulación de temperatura desde ambiente
hasta 90°C
v Precisión:+- 1°C (3)
PROCESO DE PESCA
DESARROLLO
DEL PROCESO
El
procedimiento para recuperar los mejores cortes del baño se denomina coloquialmente “pesca” y consiste en
introducir un portaobjetos en el baño hasta tocarla sección en uno de los lados
del corte. Cuando empieza la adherencia de la sección sobre el cristal se
extrae poco a poco el portaobjetos del baño, dejando drenar el agua por
gravedad. Si la orientación o la disposición del corte no es la adecuada, éste
se puede volver a reflotar y orientar. Al terminar el montaje de las
preparaciones vaciamos el baño y eliminamos cualquier vestigio de contaminación
con papel de filtro. (4)
Al momento de colocar las
láminas de parafina sobre la superficie del agua, debemos realizar un
movimiento de barrido suave.
Si se desea quitar las
burbujas que posiblemente se pueden encontrar bajo las láminas, debemos
realizar ligeros movimientos de izquierda a derecha, para no dañar la
morfología de las láminas.
Examine cada sección
mientras flota en la superficie del agua, ya que las imperfecciones se pueden ver
fácilmente.
Deje la muestra
seccionada en la superficie del agua el tiempo suficiente para que se alise.
Una expansión excesiva puede estropear la morfología en secciones sensibles.
Para propiciar un drenaje
eficiente y para prevenir que la sección se caiga del portaobjetos, extraiga
los portaobjetos del agua en posición vertical.
Eliminar los restos de
laminillas que se encuentran en el interior del baño de flotación, mediante el
uso de los extremos del papel observante. Para evitar cualquier posibilidad de
mezcla, haga flotar las secciones de un bloque simultáneamente. No debemos colocar láminas de diferentes
bloques de parafina, ya que cualquiera de las dos se puede contaminar de forma
directa o indirecta.
PORTAOBJETOS Y LA PESCA
En el proceso de la pesca, los portaobjetos
cumplen un papel fundamental, ya que estos son los que sujetan las distintas
láminas de tejido, para su posterior proceso de desparafinización.
Drene el agua excedente
de debajo de la sección antes de secarla. Esto es vital si los portaobjetos
están secos y planos sobre una placa caliente.
El
portaobjetos se debe introducir en el agua de manera horizontal, ya que esto permite realizar
movimiento para localizar y centrar las láminas en el portaobjetos.
Los portaobjetos pueden
ser almacenados en estantes en posición vertical y después secados en un horno.
Siempre debemos sostener
el portaobjetos desde la zona biselada.
No sacar bruscamente el
portaobjetos del baño de flotación, lo que podría ocasionar el desprendimiento
de las láminas.
CONCLUSIONES
Ø
En
conclusión el baño de flotación es importante debido a que este ayuda a que el corte del tejido se pueda estirar completamente
para posteriormente pescarlo y de esta
forma el tejido se mantenga intacto.
Ø
En
conclusión se pudo determinar que el agua es una de las sustancias más
adecuadas para usar en el baño de flotación debido a que en esta podemos ver
las impurezas con mayor facilidad, además de su limpieza se hace de manera
óptima.
Ø
Como
conclusión el equipo de baño de flotación es un equipo de forma circular o
rectangular dependiendo del modelo, el cual consta de una cubeta, de los controles, botón de
encendido y apagado…
Ø
En
conclusión uno de los principales problemas del baño de flotación es que los
tejidos si los ubicamos al borde de la cubeta estos por acción del calor se
pueden quedar pegados al mismo dañando
el teflón del mismo.
RECOMENDACIONES
·
Se
recomienda pescar el tejido introduciendo totalmente el portaobjetos.
·
Se
recomienda usar agua para el baño de flotación
·
Se
recomienda tener a lado del micrótomo el baño de flotación
gracias por la información, seria de mucha ayuda saber de donde sacaste la información
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