lunes, 9 de noviembre de 2015
INFORME N°1
UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
LIC. IVÁN PEÑAFIEL
INFORME DE LABORATORIO N°1
MICHELLE
SÁNCHEZ
3°
SEMESTRE
PERIODO ACADÉMICO
OCTUBRE
2015-FEBRERO 2016
RIOBAMBA-ECUADOR
OBJETIVOS
OBGETIVO GENERAL
·
Identificar el área de anatomía patológica
OBJETIVOS ESPECIFICOS
·
Realizar reconocimiento del área total
requerida y distribución para un laboratorio de anatomía patológica.
·
Observar los equipos y materiales
necesarios en cada área de trabajo en un laboratorio de anatomía patológica.
·
Clasificar cada uno de los desechos
generados dentro del área de anatomía patológica.
FUNDAMENTO TEÓRICO O CONTENIDO
CIENTÍFICO
FIJACIÓN
Es
el paso más importante al llevar a cabo las técnicas de preparación de muestras
histológicas. No importa el cuidado con el que procese y seccione las muestras
de tejido, los detalles morfológicos esenciales sólo se mostrarán si el tejido
se fija de manera adecuada y rápida.
Casi
siempre es más difícil seccionar las muestras mal fijadas que aquellas que
eestán bien fijadas.
Los
tejidos mal fijados siempre nos mostrarán menos características morfológicas,
aunque se hayan procesado de manera óptima y con cuidado.
PROCESAMIENTO DE TEJIDOS
Un
bloque de parafina será difícil de seccionar, a no ser que una muestra bien
fijada sea procesada de la manera adecuada utilizando un programa apropiado.
Las
muestras pueden estar poco procesadas (muestra demasiado grande, programa
demasiado breve) o demasiado procesadas (programa demasiado largo para el
tamaño y la naturaleza de la muestra). En ambos casos, puede ser difícil o
imposible realizar un corte.
Existen
varias técnicas que pueden utilizar para obtener secciones de bloques
difíciles.
Si
es difícil seccionar el bloque porque el tejido es duro, la superficie expuesta
puede empaparse en agua fría o en un agente reblandecedor, como una solución de
detergente blando, suavizante.
Para
muestras calcificadas, puede aplicar un agente decalcificador, durante 10
minutos o más, en el tejido expuesto, ello te permitirá obtener varias
secciones. Enjuague bien los bloques antes de montarlos en el porta muestras
del micrótomo y de volver a cortarlos, ya que los rastros del agente de
descalcificación dañarán la placa de presión del porta cuchillas.
Evitar
aquellas secciones de bloques difíciles en los que la fijación, el
procesamiento o la infiltración puede ser errónea y los métodos de corte normales
no se realizan con éxito.
Cuando
es posible obtener secciones de un bloque porque la muestra ha sido
incorrectamente procesada en primera instancia, puede ser posible reprocesarlo.
INCLUSIÓN DE TEJIDOS EN PARAFINA
Realice
la inclusión de la muestras con cuidado.
La
inclusión es un paso importante que precisa una aproximación cuidadosa. Una
inclusión poco cuidadosa puede hacer la microtomía mucho más difícil.
No
llenar lo suficiente el molde de inclusión puede dar lugar a una sujeción
inestable en el micrótomo y originar cortes de distinto espesor (uno grueso,
después otro fino) y otros problemas.
Evitar
llenar excesivamente los moldes de inclusión, porque esto puede interferir con
la alineación correcta de la cara del bloque durante el corte.
Cualquier
exceso de parafina en la parte exterior del molde de inclusión debería ser
eliminado antes de sujetarlo, para asegurarse de que el bloque está sujeto con
firmeza durante el seccionamiento.
MICROTOMÍA
La
posición del micrótomo en el laboratorio es importante.
Coloque
el micrótomo en un lugar estable, lejos de ráfagas de aire, puertas y puntos de
paso, cualquier movimiento de aire debido a los equipos de aire acondicionado u
otras causas puede hacer que el tratamiento de la sección sea muy difícil.
Es
preferible utilizar un banco ajustable en altura y una silla ergonómica.
Es
muy importante que el personal no esté distraído al usar el micrótomo por los
riesgos de lesionarse con cuchillas extremadamente afiladas. Al colocar los
micrótomos en un laboratorio debería considerarse el potencial para interactuar
con otros miembros del personal.
Es
preferible tener un suelo antideslizante en las inmediaciones de los micrótomos
porque inevitablemente, los fragmentos de parafina caerán al suelo y pueden
originar una superficie resbaladiza. Muchos laboratorios usan esterillas
antideslizantes para que el entorno sea más seguro.
ESTUDIE LAS CARACTERÍSTICAS DE SU
MICRÓTOMO Y APRENDA A USARLAS
Los
micrótomos retracción están diseñados para que la muestra se retire de la cuchilla
en la carrera ascendente. Es importante saber si su micrótomo tiene esa
prestación.
La
posición retraída es una característica de diseño que proporciona distintas
ventajas durante el corte y prolonga la vida de la cuchilla.
Al
usar un micrótomo de retracción, el alineamiento de la cara del bloque al borde
de la cuchilla debe ser efectuado con el bloque en la carrera descendente ( en
la posición avanzada no retraída).
Si
un bloque está alineado cerca del borde de la cuchilla mientras el brazo de la
muestra está en posición retraída, en la siguiente vuelta completa del volante,
el bloque avanzará en función del valor de la posición retraída más el grosor
de la sección seleccionada, esto provocaría que se cortara un trozo grueso que
podría dañar tanto la muestra como la cuchillas.
Los
micrótomos también pueden der manuales, semimotorizados o completamente
motorizados.
Los
equipos motorizados reducen los movimientos repetitivos que pueden contribuir a
desarrollar enfermedades músculo-esqueléticas.
MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
·
Macroscopía
·
Equipo o estación de inclusión de tejidos
en parafina
·
Plancha fría 5°C
·
Micrótomo
·
Baño de flotación
·
Estufa de histopatología
·
Batería de tinción.
MUESTRA: INSTRUMENTOS Y EQUIPOS
PROCEDIMIENTO
·
El estudiante recibirá información sobre
el área, distribución y elementos que deben integrar el laboratorio de Anatomía
Patológica.
·
El estudiante observará, conocerá y pondrá
e práctica los protocolos de generación y eliminación de desechos.
·
El estudiante elaborará su propio manual
de desechos aplicado en un laboratorio de anatomía patológica.
TÉCNICA
BARRERAS
DE BIOSEGURIDAD
Tiene como finalidad evitar la exposición
directa a sangre y otros fluidos orgánicos potencialmente contaminantes,
mediante la utilización de materiales adecuados que se interpongan al contacto
de los mismos.
·
Guantes: Su uso tiene como
objetivo la protección del personal de salud
·
Mascarillas: Se utilizan para
proteger las mucosas de nariz y boca contra la inhalación o ingestión de
partículas presentes en el aire, en los aerosoles, etc.
·
Protectores oculares: Los protectores
oculares sirven para proteger la conjuntiva ocular y el ojo de la contaminación
·
Mandil: El mandil protege la
piel de brazos y cuello de salpicaduras de sangre y saliva, aerosoles y partículas
generadas durante el trabajo
·
Gorra: Evita la
contaminación de los cabellos por aerosoles o gotas de saliva y/o sangre
generadas por el trabajo
ELIMINACIÓN
DE RESIDUOS CONTAMINADOS
RESIDUO
BIOCONTAMINADO.
Son
aquellos residuos peligrosos generados en el proceso de
la atención e investigación médica
que están contaminados con agentes infecciosos, o que pueden contener altas
concentraciones de microorganismos que son de potencial riesgo para la persona que
entre en contacto con dichos residuos.
·
Biológico: Compuesto por cultivos
inóculos, mezcla de microorganismos y medios de
cultivo inoculados provenientes del laboratorio clínico
o de investigación, vacunas vencidas
o inutilizadas, filtro de gases aspiradores
de áreas contaminadas con agentes infecciosos y cualquier residuo contaminado
por estos materiales.
·
Bolsas
conteniendo sangre y
hemoderivados: Este grupo está
constituido por materiales o bolsas con contenido de sangre humana de
pacientes, con plazo de utilización vencida, serología positiva, muestras de
sangre para análisis, suero plasma y otros subproductos o hemoderivados.
·
Residuos
quirúrgicos y anátomo-patológicos: Compuesto por tejidos,
órganos, piezas anatómicas y residuos sólidos contaminados con sangre
resultantes de una cirugía, autopsia u
otros.
·
Punzo
cortantes: Compuesto
por elementos punzo cortantes que estuvieron en contacto con pacientes o
agentes infecciosos, incluyen agujas hipodérmicas, jeringas, pipetas, bisturís,
placas de cultivo, agujas de sutura, catéteres con aguja y otros objetos
de vidrio enteros
o rotos u objetos corto punzantes desechados.
·
Animales contaminados: Se incluyen aquí a
cadáveres o partes de animales inoculados, expuestos a microorganismos
patógenos o portadores de enfermedades infectocontagiosas así como sus lechos o
residuos que hayan tenido contacto con este.
·
Atención
al paciente: Residuos
sólidos contaminados con secreciones, excreciones y demás líquidos orgánicos
provenientes de la atención de pacientes, incluyéndose los restos de alimentos.
RESIDUO
ESPECIAL
Son
aquellos residuos generados en los hospitales, con características físicas y
químicas de potencial peligro por lo corrosivo, inflamable, tóxico, explosivo y
reactivo para la persona expuesta.
·
Residuos
Químicos peligrosos: Recipientes
o materiales contaminados por sustancias o productos químicos con
características tóxicas, corrosivas, inflamables, explosivos, reactivas,
genotógicos o mutagénicos, tales como quimioterapéuticos, productos químicos no
utilizados; plaguicidas fuera de especificación, solventes, ácido crómico
(usado en limpieza de vidrio de laboratorio), mercurio de
termómetros, soluciones para
revelado de radiografías, aceites lubricantes usados, entre otros.
·
Residuos
Farmacéuticos: Compuesto
por medicamentos vencidos, contaminados, desactualizados, no utilizados
provenientes de ensayos de
investigación, entre otros.
·
Residuos
radioactivos: Compuesto
por materiales radioactivos o contaminados con radioisótopos de baja actividad,
provenientes de laboratorios de investigación química y biología.
RESIDUO
COMÚN.
Compuesto
por todos los residuos que no se encuentran en ninguna de las categorías
anteriores y que por su semejanza con los residuos domésticos pueden ser
considerados como tales.
ÁREA DE MACROSCOPÍA
Procesamiento macroscópico de biopsias
(descripción y selección de bloques histológicos).
Procesado de muestras e intraoperatorias (20
m2). Incluye 4 zonas diferenciadas:
·
Zona de macroscopía o “tallado” (estudios
macroscópicos e inclusión) (20 m2):
El Servicio cuenta con 2 puestos de
macroscopía situados en dos salas independientes. La sala 1 está equipada con
impresora de casetes de alta capacidad (200 casetes) y dictáfono. Cada sala
cuenta con un ordenador con puesto cliente del sistema de información de
anatomía patológica.
·
Zona de fotografía macroscópica:
Se encuentras en las salas de microscopía
arriba descritas. Cada una de estas salas está equipada con un sistema digital
de fotografía macroscópica y estativo.
·
Zona de estudios intraoperatorios:
2 criostatos, baterias de tinción rápida,
sistema de congelación mediante nitrógeno líquido. Se encuentra situada dentro
del área de tallado general.
·
Zona de procesamiento de tejidos:
Dos procesadores de tejidos, con capacidad de
hasta 500 casetes de tejidos. Se encuentra situada dentro del área de tallado
general.
EQUIPO
O ESTACIÓN DE INCLUSIÓN DE TEJIDOS EN PARAFINA
La inclusión permite obtener cortes finos y
homogéneos para el cual las piezas acortan deberán tener una determinada
consistencia y uniformidad.
El medio de inclusión debe ser un medio
líquido que posteriormente se solidifique de forma homogénea. Este medio de
inclusión deber penetrar en todos los espacios libres de los tejidos.
Hay medios de inclusión que son solubles en
agua y otros que no. En éste último caso ha de ser reemplazado por el solvente
apropiado al medio de inclusión que se utilice con excepción de tejidos
destinados a congelación, la mayor parte de las muestras para estudio
histopatológico, requiere la inclusión en un medio sólido y ésta puede hacerse
de forma manual o automática.
Consta de tres unidades independientes: un
eficiente dispensador de parafina (MPS P), una plataforma de enfriamiento (MPS
C) y una unidad de precalentamiento (MPS W). Cada una de ellas con control
electrónico de temperatura independiente.
Informaciones
de seguridad
Siempre que este equipo esté encendido puede
alcanzar 60 a 65º C.
- El uso del aparato debe ser reservado a
personal instruido.
- Para manejar el aparato intachablemente, es
imprescindible leer el manual de instrucciones y familiarizarse con todos los
detalles técnicos antes de comenzar a trabajar.
- La parafina es una sustancia inflamable;
por eso hay que manejarla con el cuidado apropiado. Evite derramar parafina
líquida. No quite raspando restos de parafina, que queden en la superficie de
trabajo, porque así se podría dañar el revestimiento de la superficie. También
evite que todos los revestimientos de la superficie del aparato entren en
contacto con xilol.
Procedimiento
Para trabajar con el equipo:
1. Encender el interruptor de la parte
posterior derecha del equipo.
2. Inicio inmediato, pulsar tecla On/Off del
panel de control durante unos segundos hasta que la ventana cambie de gris a
verde e indique el mensaje “Yo hablo español”.
3. En el menú se indicará la temperatura de
la placa caliente, y la cantidad de parafina en el depósito. Para la
programación del equipo seguir indicaciones de manual mediante los botones de
menú de la figura posterior.
Protocolo
general de inclusión
1. Tome los cassettes con las muestras del
cesto del procesador y póngalos dentro del recipiente de parafina líquido;
2. abra el cassette, quite y deseche la tapa,
y ponga la muestra en el plato semi-frío;
3. usando las pinzas recoger un molde
adecuado a la muestra;
4. llenar el molde con la parafina líquida;
5. colocar y orientar adecuadamente la
muestra en el molde con parafina;
6. colocar el cassette encima del molde y
ponerlo en la placa fría;
7. después, quite el bloque de parafina del
molde, limpie el molde de restos de parafina completamente y colóquelo de nuevo
en su lugar y guarde el bloque de tejido parafinado a temperatura ambiente (o
-20ºC para el uso inmediato).
AREA DE CORTE DE TEJIDOS
Se deben procesar los cortes suficientes de
las lesiones más representativas. La toma de los cortes se facilita cuando las
piezas han tenido un tiempo suficiente de fijación, para lo cual vale recordar
lo siguiente:
1. El tamaño de la muestra y el volumen del fijador.
2. El espesor de la muestra y la penetra -
ción del fijador.
3. El contacto del fijador con la superfi -
cie de la muestra.
4. El tipo de fijador y el tiempo de
fijación.
MICROTOMO
El micrótomo es un equipo mecánico de
precisión que se utiliza para realizar cortes en tejidos que han sido objeto de
inclusión en parafina, siendo las secciones conseguidas de espesor micrométrico
lo suficientemente delgadas para permitir su examen por el microscopio.
Sirve para obtener cortes lo suficientemente
finos (de 4 a 6 m) del tejido incluido (en parafina) para su
posterior visualización con el microscopio óptico.
Componentes
y material necesario:
En el mercado existen una gran variedad de
modelos modernos.
Componentes
·
Un porta
bloques con orientación regulable que avanza sobre una cuchilla
discontinuamente
·
Un porta
cuchillas con un sistema para regular la inclinación de la cuchilla
·
Una
palanca que actúa de tornillo macrométrico que acerca o aleja el porta bloques
a la cuchilla
·
Un
tornillo micrométrico que mueve el porta bloques de arriba hacia abajo
haciéndolo incidir sobre la cuchilla y un tornillo en donde pone el grosor de
los cortes.
Materiales
·
Una
cuchilla para micrótomo
·
Un baño
con agua relativamente caliente para estirar los cortes ya que se pliegan
·
Una aguja
histológica para recoger los cortes realizados y ponerlos en el baño para que
se estiren
·
Una bolsa
de basura para tirar lo desbastado y los cortes inservibles
·
Un
cepillo para limpiar el micrótomo
·
Portaobjetos
para recoger los cortes elegidos del baño
·
Lápiz de
grafito para numerar los portaobjetos
Procedimiento
técnico
·
Colocar
el material en la mesa del micrótomo
·
Sacar la
parafina del refrigerador y eliminar los restos de su periferia
·
Colocar
en el porta bloques
·
Orientar
el porta bloques y la cuchilla
·
Poner un
grosor de 20 m para desbastar hasta conseguir un corte
uniforme en el que aparezca toda la superficie del tejido
·
Cambiar
el grosor a 4 o 6 m para obtener cortes finos que se recogen con la aguja histológica y se
depositan en el baño
·
Una vez
estirados se recogen los cortes con portaobjetos numerados para su secado en la
estufa
·
Limpiar
el micrótomo
·
Recoger
todo el material sobrante
·
Guardar
en el refrigerador la parafina no utilizada y sobrante
BAÑO DE FLOTACION
El baño de María es un equipo que se utiliza
en el laboratorio para realizar pruebas serológicas y procedimientos de
incubación, aglutinación, inactivación, biomédicos, farmacéuticos y hasta
industriales.
Por lo general, se utilizan con agua, pero
también permiten trabajar con aceite. Los rangos de temperatura en los cuales
normalmente son utilizados están entre la temperatura ambientey los 60 °C.
También se pueden seleccionar temperaturas de
100 °C, utilizando una tapa de características especiales. Los baños de María
son fabricados con cámaras cuya capacidad puede seleccionarse entre los 2 y los
30 litros.
Los baños de María están constituidos por un
tanque fabricado en material inoxidable, el cual tiene montado en la parte
inferior del mismo un conjunto de resistencias eléctricas, mediante las cuales
se transfiere calor a un medio como agua o aceite, que se mantiene a una
temperatura preseleccionada a través de un dispositivo de control –termo par,
termostato, termistor o similar– que permite seleccionar la temperatura
requerida por los diversos tipos de análisis o pruebas.
Dispone de un cuerpo externo donde se
encuentran ubicados los controles mencionados, el cual se fabrica en acero y se
recubre generalmente con pintura electrostática de alta adherencia y
resistencia a las condiciones ambientales
propias de un laboratorio. Las resistencias pueden ser las siguientes:
propias de un laboratorio. Las resistencias pueden ser las siguientes:
·
De inmersión.
Se caracterizan por estar instaladas dentro
de un tubo sellado. Están ubicadas en la parte inferior del recipiente y se
encuentran en contacto directo con el medio a calentar.
·
Externas.
Se encuentran ubicadas en la parte inferior
pero son externas al tanque están protegidas por un material aislante que evita
pérdidas de calor. Este tipo de resistencias transfiere el calor al fondo del
tanque por medio de conducción térmica.
Dependiendo del tipo de baño, algunos
disponen de una serie de accesorios como sistemas de agitación, que imprimen al
medio calefactor un movimiento cuidadosamente controlado para mantener la
temperatura lo más uniforme posible.
ÁREA
DE BATERÍA DE TINCIÓN
En ésta área se tiene un conjunto de
colorantes y reactivos a los que se somete el corte de tejido.
El más usado es la coloración hematoxilina
eosina.
PASOS
1.
Desparafinar
los cortes en xilol
2.
Hidratar
los cortes en baños decrecientes de alcohol
3.
Colorear
con la solución de hematoxilina
4.
Lavado en
agua destilada
5.
Diferenciar,
para eliminar el exceso de colorante, para ello se emplea el alcohol ácido
6.
Virar al
color azul usando sustancias alcalinas como agua amoniacal
7.
Colorear
con una solución alcohólica o acuosa de eosina
8.
Deshidratar
en baños crecientes de alcohol etílico
9.
Diafanizar
o aclarar empleando xilol
CONCLUSIONES
·
Identificamos
los lugares para la correcta eliminación de desechos
·
Se
reconoció las áreas de las que se encuentra formado el laboratorio de anatomía
patológica y cada uno de los equipos que se encuentran en las mismas.
·
Se
pudo identificar los equipos que se encuentran en el laboratorio y la actividad
que cumple cada uno de ellos.
·
El
estudio macroscópico debe llevarse a cabo correctamente y con mucha seriedad, debido
a que es el primer estadio por el que los tejidos deben pasar, para así evitar
un mal procesamiento de la muestra.
RECOMENDACIONES
·
Antes
de ingresar al laboratorio se debe llevar todas las barreras de bioseguridad
·
No
entrar al laboratorio con comida
·
Evitar
llevar bolsos o mochilas grandes
·
Llevar
siempre una libreta pequeña y un esfero que sean utilizados únicamente para
laboratorio
·
Evitar
el uso excesivo de maquillaje.
BIBLIOGRAFÍA Y SITIOS WEB
·
Junco Díaz R. Riesgo ocupacional por exposición a objetos
corto punzantes en trabajadores de la salud. Rev Cubana Hig Epidemiol.2003;41(2: http://www.monografias.com/trabajos94/eliminacion-desechos-hospitalarios/eliminacion-desechos-hospitalarios.shtml#ixzz3qUuX3JWS
·
Stohr P.
H. Manuel technique d’Histologie. Paris G. Steinheil, Editeur. 1904: http://www.netlab.com.ec/publicaciones/MANUAL-PROCEDIMIENTOS-ANATOMIA-PATOLOGICA.pdf
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